抗体药物Tositumomab作为一种新型的抗癌药物,在临床治疗中具有重要意义。由于它是靶向性药物,临床病人血液中存在Tositumomab靶向抗体的情况越多,临床疗效越明显。因此,建立Tositumomab抗体的遗传检测方法显得尤为重要,以有效判断体内是否有Tositumomab的存在。那么,选择什么样品进行Tositumomab基因检测会更准确?

一、关于Tositumomab靶向抗体的表达

无论是体外实验还是临床实验表明,Tositumomab靶向抗体是通过大量表达在血液中形成的。Tositumomab靶向抗体具有特定的宿主单克隆抗体和自身的结构,会非常稳定的存在于血液中,并保持活力和抗体的完整性,所以从血液中检测Tositumomab基因是最准确的。

二、Tositumomab基因检测的步骤

1、采集血样:由于Tositumomab抗体稳定的存在于血液中,因此可以采集血样,利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术对Tositumomab基因进行检测。

2、样品处理:根据 PCR 检测所需,将采集的血样进行处理,通常是将靶向抗体进行蛋白质降解,以获得 DNA 共检测。

3、设计引物:在设计引物时,应确定设计引物的长度、注释上下界和碱基杂合度,以保证检测准确性。

4、进行检测:在确定参考物种,检测参数、添加反应体系后,将样品放入定量PCR机中,进行qPCR的 amplification 和检测。假如没有血液样品,也可以使用其他组织样品进行Tositumomab抗体的检测,如:组织病理样本、结缔组织或细胞集落中的克隆细胞样品,由于表达时间、强度和数量的差异会对检测结果产生一定的影响。

三、Tositumomab基因检测的结果评估一般来说,Tositumomab基因检测的结果会给出 Ct 值(抑制周期)或 Tm(碱基特异性温度)和 relative copy 数。Ct值越小,表明目标基因的表达数量越多;Tm 值越高,表明反应的特异性越强;而 relative copy 数越高,表明 Tositumomab 的表达数量越多。

综上所述,由于Tositumomab靶向抗体是通过大量表达在血液中存在,所以从血液中检测Tositumomab基因更加准确。采集血样后,通过设计引物,添加反应体系,进行 PCR 检测,最终获得Tositumomab基因检测结果,以便对临床治疗病人进行准确分析。